OBJETIVO: Apresentar um modelo experimental de análise qualitativa e quantitativa de células tronco mesênquimais proveniente da gordura de coelhos obtido por lipectomia. A gordura poderia ser uma grande fonte de obtenção de células tronco mesenquimais, criando condições para a reparação de tecidos lesados. MÉTODOS: Foram removidos os panículos adiposos (2-3 cm) da região cervical de Coelhos Nova Zelândia (n = 10) por lipectomia. Os panículos foram fragmentados e lavados com PBS e, posteriormente, dissociados enzimaticamente com tripsina / EDTA. As células extraídas do panículo adiposo foram incubadas em meio de cultura DMEM e após 20 dias, foi realizada uma análise quantitativa da adesão de primeira e segunda passagem das células mesênquimais em garrafas de cultura. RESULTADOS: Foram extraídas 1,62 x106 cel/ mL células totais de gordura (CTG) with 98% de viabilidade. Essas células foram levadas para o cultivo e após 20 dias, foi realizada a primeira passagem (1pd) sendo quantificadas 2,88 x10(6) cel/mL células tronco mesênquimais (CTM). Na segunda passagem (2pd) foi obtido 4,28 x10(6) cel/mL CTM. CONCLUSÃO: A lipectomia do paniculo adiposo é um método muito satisfatório para extrair células tronco a partir de gordura, quantitativamente e qualitativamente.

PURPOSE: To present an experimental model of qualitative and quantitative analysis of mesenchymal stem cells from fat of rabbits obtained by lipectomy. The fat could be a great source for obtaining mesenchymal stem cells and to create conditions for repairing injured tissues by bioengineering. METHODS: New Zealand rabbits (n= 10) adipose panicle (2-3 cm) were removed by lipectomy, fragmented and washed with PBS and enzymatically dissociated with trypsin/EDTA. Lately, these cells were incubated in culture medium DMEM and after 20 days, was performed quantitative analysis of the accession of first and second mesenchymal cells in cell culture bottles. RESULTS: The fat total cells (CTF) were 1.62 x10(6) cells/mL and presented 98% of viability. These cells were taken for cultivation and after 20 days were counted 2.88 x10(6) cells/mL MSC. The same was done and after 20 days we quantified 4.28 x10(6) cells/mL MSC. CONCLUSION: The lipectomy of adipose panicule is a very satisfactory method to extract stem cells from fat, quantitatively and qualitatively.

OBJETIVO: Avaliar a técnica mais promissora para a coleta de células tronco adultas de medula óssea de coelhos para a utilização do mesmo como modelo experimental na medicina regenerativa. MÉTODOS: Foram utilizados 30 coelhos divididos em 2 grupos: GRUPO A, n=8, onde realizamos a coleta de sangue de medula óssea (MO) da crista ilíaca e grupo B, n=22, onde realizamos a coleta de sangue da medula óssea da epífise do fêmur. Após as coletas, realizamos a separação das células mononucleadas através do gradiente de densidade (Ficoll-Hystopaque). Através da câmara de Neubauer realizamos a contagem das células mononucleadas por ml. Testamos a viabilidade celular através do método Tripan Blue. RESULTADOS: Na coleta de sangue de MO na crista ilíaca obtivemos a média de 1 ml durante 1 hora de procedimento cirúrgico, obtendo a quantidade de 3,6 .10(6) células/ml, enquanto que a punção na epífise do fêmur obtivemos a média de 3 ml durante 30 minutos de procedimento cirúrgico obtendo a quantidade de 11,79.10(6) cél./ml diminuindo o óbito dos animais. CONCLUSÃO: A análise para a obtenção de maior número de células mononucleadas/ml de sangue de medula óssea de coelho foi mais satisfatória na região da epífise do fêmur em comparação com a crista ilíaca.

PURPOSE: To assess the technique for the collection of rabbit bone marrow stem cells from different regions to be used as an experimental model in regenerative medicine. METHODS: Thirty rabbits were allocated into 2 groups: GROUP A, n=8, animals that underwent bone marrow blood (BMB) harvesting from the iliac crest; and GROUP B: including 22 rabbits that underwent BMB harvesting from the femur epiphysis. After harvesting, mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation (Ficoll - Histopaque). The number of mononuclear cells per ml was counted in a Neubauer chamber and cell viability was checked through Tripan Blue method. RESULTS: Harvesting from the iliac crest yielded an average of 1 ml of BMB and 3,6.10(6) cells/ml over 1 hour of surgery, whereas an average of 3ml of BMB and 11,79.10(6) cells./ml were obtained in 30 min from the femur epiphysis with a reduced animal death rate. CONCLUSION: The analysis for the obtention of a larger number of mononuclear cells/ml from rabbit bone marrow blood was more satisfactory in the femur epiphysis than in the iliac crest.

OBJETIVO: Avaliar a resposta biológica que o oleato de etanolamina possa desencadear na parede de veias superficiais normais de cães. MÉTODOS: Utilizados 39 cães, sem raça definida, adultos, machos, com peso variando entre 10 a 18 kg, distribuídos de modo aleatório em três grupos: grupo 1, avaliados após 7 dias, grupo 2, 14 dias e grupo 3, 21 dias. O procedimento foi realizado em duas fases. A primeira constou da injeção de 2 ml do oleato de monoetanolamina a 5%, por punção única na veia cefálica do membro torácico do cão. A segunda, realizada 7, 14 e 21 dias após, constou da retirada da peça operatória, tendo sido executada em três tempos diferentes, conforme o grupo a que pertencia o animal. As veias contralaterais foram extraídas como controle. Para estudo histológico utilizaram-se os métodos de hematoxilina-eosina e tricrômio de Masson. RESULTADOS: A trombose venosa e a organização do trombo ocorreram em todos animais estudados. A recanalização do trombo não foi observada de modo estatisticamente significante, até 21 dias de exame. Encontrou-se lesão de túnica média, que não foi acompanhada de correspondente processo inflamatório. Na túnica adventícia este processo foi visto nos três períodos de tempo estudados. Depósitos de hemossiderina em fagócitos ocorreram aos 14 e 21 dias de experimento. Extravasamento de esclerosante foi observado somente na primeira semana de estudo. Material hialino fibrinóide foi encontrado aos 21 dias de experimento. CONCLUSÕES: O oleato de etanolamina em contato com a parede interna da veia superficial produziu trombose venosa, a qual se organizou em todos os casos, não se observando sua recanalização durante o tempo deste ensaio. Houve lesão da túnica média venosa em todos animais estudados, sem que houvesse processo inflamatório reativo nesse local. Na túnica adventícia venosa surgiu processo inflamatório, além de sinais de extravasamento do esclerosante, da presença de hemossiderina e de material hialino externos à veia.

OBJECTIVE: Evaluate the ethanolamine oleate effects on venous dog wall. METHODS: The cephalic vein wall changes were evaluated in 39 male adults mongrel dogs, weighing 10-18 kg, randomly distributed in three groups (group 1 = 7 days, group 2 = 14 days and group 3, 21 days). Single punction and injection of 2 mL of 5 % ethanolamine oleate and 7, 14 and 21 days later operative specimen excision were compared to non-injected contralateral control vein. Histological parameters evaluated (hematoxylin-eosin and Masson's trichrome staining methods) were: venous thrombosis and organization, thrombus recanalization, media layer lesion and inflammatory process, outer wall inflammatory process, hemossiderin, sclerosant spillage outside the outer layer and hyaline amorphous material deposition. RESULTS: Venous thrombosis and thrombus organization were seen in all animals. Thrombus recanalization was not shown until 21 days. Media layer lesion occurred without inflammatory process. Outer wall inflammatory process was seen in all three time periods. Hemossiderin phagocytes occurred on 14th and 21st days. Sclerosant spillage outside the outer layer was seen only on the 7th day. Hyaline amorphous material deposition was seen only on the 21st day. CONCLUSIONS: Ethanolamin oleate in contact with the inner vein wall produced venous thrombosis, organized in all cases. During this study no significant recanalization was observed. Media layer vein lesion was seen in all animals without any correlate inflammatory reactive process. Reactive inflammatory process, hemossiderin phagocytosis, sclerosant spillage and hyaline amorphous material deposition was shown in the adventitia layer.

Substâncias químicas têm sido empregadas no tratamento de varizes esofagogástricas na prevenção de hemorragia digestiva e no seu tratamento pela esclerose ou obliteração venosa, como uma alternativa ao tratamento cirúrgico. O adesivo sintético, etil-cianoacrilato, mostrando rápida polimerização, baixo custo, disponibilidade comercial e boa fluidez para a injeção intravenosa, é útil neste propósito. OBJETIVO: Estudar os efeitos do etil-cianoacrilato na parede venosa de cães. MÉTODOS: Foram utilizados 42 cães, sem raça definida, adultos, machos, com peso variando entre 10 a 13 kg, distribuídos de modo aleatório, em três grupos: grupo 1, avaliados após 7 dias, grupo 2 , 14 dias e grupo 3 , 21 dias. O procedimento foi realizado em duas fases. A primeira constou da injeção de 1 ml de etil-cianoacrilato, por punção única, na veia cefálica do membro torácico do cão. A segunda, realizada 7, 14 e 21 dias após, constou da retirada da peça operatória, contendo o polímero no seu interior e da veia contralateral, sem o mesmo, como controle. Para estudo histológico utilizou-se o método da hematoxilina-eosina. Variáveis estudadas: obliteração, reações inflamatórias: aguda e crônica, tecido de granulação e lesão de parede das veias. RESULTADOS: A obliteração ocorreu em todos cães estudados, nos períodos de 7, 14 e 21 dias. A reação inflamatória surgiu no período de 7 dias e foi encontrada em todos animais aos 14 e 21 dias. O tecido de granulação após 21 dias. A lesão de parede venosa ocorreu em todas veias estudadas. CONCLUSÃO: O etil-cianoacrilato em contato com a parede interna de veia superficial provoca obliteração da veia e lesão da parede venosa de cães.

Chemical drugs for vein sclerosis and / or obliteration has been used in esophagogastric varices endoscopic management, trying to treat and prevent digestive hemorrhage as an alternative for surgical treatment. The synthetic adhesive ethyl-cyanoacrylate showing fast polymerization, low cost, commercial availability and good fluidity for intravenous injection, was useful for that purpose. OBJECTIVE: To study the ethyl-cyanoacrylate effects on venous wall, in dogs. METHODS: The cephalic vein wall changes were evaluated in 42 male adults mongrel dogs, weighing 10-13 Kg, randomly distributed in three groups (group 1 = 7 days, group 2 = 14 days and group 3 = 21 days). Single punction and injection of 1 ml of ethyl-cyanoacrilate, and 7, 14 and 21 days later operative specimen excision, having inside the polymer. The non-injected contralateral vein remained as control. Histopathological parameters evaluated (hematoxylin-eosin) were: venous obliteration by adhesive polymerization, acute and chronic inflammatory process, venous wall lesion and granulation tissue degree. RESULTS: Statistical analysis showed lumen complete obliteration and venous wall lesion in all injected animals on 7, 14 and 21 days; prominent acute and chronic inflammation on 14 and 21 days and granulation tissue found only on 21 day. CONCLUSION: Complete obliteration and venous wall injury in all injected animals was shown on 7, 14 and 21 days. Prominent acute and chronic inflammation occurred after 14th day, and granulation tissue only after the 21st day.